Peroksidaz Deneyi Nasıl Yapılır?

Peroksidaz Deneyi

Yöntemin Prensibi
 
Yöntem peroksidaz enziminin, hidrojen peroksitten oksijeni ayırıp p-fenilendiamin gibi oksitlendiğinde renk değiştiren maddelerin oksijeni bağlama özelliği prensibine dayanır.
 
Peroksidaz enzimi sütte doğal olarak bulunan bir enzimdir. Bu deney sayesinde işletmeye gelen sütün kaynamış olup olmadığı veya pastörize sırasında uygulanan sıcaklığın normal değerin üstünde olup olmadığı kontrol edilir.

 
I. Yöntem
 
Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

• Erlen (100mL)
• Terazi
• Pipet ( 1 mL)
• Balonjoje (100 mL, 200 mL)

Kullanılan Kimyasallar

1. %0.2’lik hidrojen peroksit (H2O2) çözeltisi: %30’luk H2O2 çözeltisinden 1 mL alınarak üzerine 149 mL saf su eklenir. Üzerine 0.15 mL derişik sulfurik asit eklenir.
2. %2’lik parafenilen diamin çözeltisi: 2 g parafenilen diamin bir miktar sıcak saf su içerisinde çözülerek son hacmi 100 mL’ye tamamlanır.(48 saat içerisinde kullanılmalıdır)

 
Deneyin Yapılışı
 
10 g örnek  erlenin içerisine tartılır. Üzerine 2 damla %0.2’lik hidrojen peroksit eklenerek karıştırılır. 2 damla %2’lik parafenilen diamin çözeltisi eklenerek tekrar karıştırılır. Mavi renk meydana gelirse peroksidaz pozitif, renk değişimi olmazsa peroksidaz negatiftir.

 
Yöntem II
 
Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

• Erlen (100mL)
• Terazi
• Pipet ( 1mL, 5mL, 25 mL)
• Balonjoje ( 100 mL)

Kullanılan Kimyasallar
 
%1’lik guasikol çözeltisi (alkol içerisinde): 1 g guasikol bi rmiktar %96’lık etilalkol içerisinde çözünerek son hacim 100 mL’ye tamamlanır.
 
%0.3’lük hidrojen peroksit (H2O2) çözeltisi: %30’luk H2O2 çözeltisinden 1 mL alınarak son hacim 100 mL’ye saf su ile tamamlanır.

 
Deneyin Yapılışı
 
10 g örnek  erlenin içerisine tartılır. Üzerine 20 mL saf su eklenir. 1 mL  %1’lik guasikol çözeltisi ve 1.6 mL  %0.3’lik hidrojen peroksit eklenerek karıştırılır çözeltisi eklenerek çözelti karıştırılır. Pembe  renk meydana gerilirse peroksidaz pozitif, renk değişimi olmazsa peroksidaz negatiftir.