Metilen Mavisi İndirgenme Testi Analizi Nasıl Yapılır?

Metilen Mavisi İndirgenme Testi

Yöntemin Prensibi
 
Sütteki mikroorganizmaların hemen hemen hepsi sütün oksidasyon potansiyelini, içine katılan metilen mavisi, resazurin gibi boyaların rengini değiştirerek ölçüde etkileyebilmektedir. Test edilen süte katılan metilen mavisi boya çözeltisi, sütteki mikroorganizmaların faaliyetiyle indirgenerek Löko metilen mavisine dönüşmekte ve mavi renk kaybolmaktadır. Boyanın indirgenmesinde coliform grup ile Streptococcus lactis etkin bir rol oynamaktadır. Ayrıca sütün lökosit sayısı boyanın konsantrasyonu, sıcaklık derecesi, ışıkta bekletme redüksiyonu etkilemektedir.

 
Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

• Steril Tüp ve kapak
• Steril Pipet (1, 10 mL)
• Etüv

Kullanılan Kimyasallar
 
Metilen mavisi çözeltisi: 19 mg saf metilen mavisi içeren tablet bir miktar steril saf suda çözündükten sonra son hacim 1 L’ ye  steril saf su ile tamamlanır. Karanlık bir şişede 2 ay bozunmadan saklanabilir.

 
Deneyin Yapılışı
 
Analize alınacak süt örneği iyice karıştırıldıktan sonra içerisinden 10 mL örnek steril tüpe steril pipet ile alınır. Üzerine 1 mL metilen mavisi çözeltisi steril pipetle alınır. Steril lastik tıpa takılarak 2-3 kere ters düz edilir. Tüpler güneşten uzak tutularak  37° C’lik su banyosunda veya etüvde inkübe edilir. Su banyosundaki suyun düzeyi, tüplerdeki sütün üzerinde olmalıdır. Her yarım saate bir 2-3 kere ters düz edilmelidir. Rengin beyaza döndüğü süre tespit edilmelidir.
 
Tüpteki sütün en üst yüzeyindeki 5 mm’lik kısmın beyaza dönmemesi, göz ardı edilebilir. Bu deney depolanmış çiğ sütün dayanma yeteneğini saptamak için bazen düşük sıcaklık derecelerinde (15.5- 18.0° C) veya termofil organizmayı kontrol için yüksek sıcaklıklarda (55- 63° C) yapılabilir

Hesaplamalar