Yemlerde Üre Tayini (Kantitatif Yöntem) Analizi Nasıl Yapılır?

Üre Tayini (Kantitatif Yöntem)

Yöntemin Prensibi
 
Yem numunesinin, Carez I ve Carez II çözeltileri ile durultulduktan sonra elde edilen  süzüntüsüne 4-dimetil aminobenzaldehit eklenerek 420 nm’deki absorbansının okunması ilkesine dayanır.

 
Kullanılan Malzemeler ve Cihazlar

• Spektrofotometre
• Spektrofotometre küveti  (disposable)
• Balonjoje (100, 500 mL)
• Terazi
• Deney tüpü
• Pipet (1, 5, 10 mL)
• Filtre kağıdı
• Huni

Kullanılan Kimyasallar
 
Carez I: 22,0 g Çinko asetat (Zn(CH3COO)2.2H20) ve 3 mL glasial asetik asit (CH3COOH) saf suda çözülür ve toplam hacim 100 mL'ye saf su ile tamamlanır.
 
Carez II: 10,6 g potasyum ferrosiyanat (K4Fe(CN)6 .3H2O)  saf suda çözülüp toplam hacim 100 mL'ye saf suyla tamamlanır.

• Üre adsorbe etmeyen aktif  kömür
• 4-dimetil aminobenzaldehit çözeltisi: 1.6 g  4-dimetil  aminobenzaldehit 10 mL derişik hidroklorik asitte çözdürülür. Çözelti %96’lık etil alkol ile 100 mL’ye tamamlanır.
• % 0.1’lik üre çözeltisi: 0.1 g üre balonjojeye tartılarak son hacim saf su ile 100 mL’ye seyreltilir.

 
Deneyin Yapılışı
 
500 mL'lik bir balonjoje ye 2 g yem numunesi ve 1 g aktif kömür tartılarak alınır. Üzerine 400 mL saf su eklendikten sonra, 5 mL Carez I ve 5 mL Carez II çözeltisi eklenir. Karışım yarım saat süreyle çalkandıktan sonra saf su ile 500 mL'ye tamamlanır. Kısa bir süre durulmaya bırakılır ve süzülür. Süzüntüden 5 mL bir deney tüpüne alınarak üzerine 5 mL 4-dimetil aminobenzaldehit çözeltisinde eklenerek karıştırılır ve tam olarak sıcaklığı 20ºC' deki su banyosunda 5 dakika bekletilerek 420 nm de hemen ölçüm alınır. Kör deneme için, örnek kullanılmadan aynı işlemler tekrar yapılır.

 
Standart Eğrisinin Hazırlanması
 
% 0.1’lik üre çözeltisinden sırasıyla 1, 2, 3, 4, 5, 8  ve 10 mL alınarak 100 mL’lik balonjojeye koyulur ve hacim çizgisine kadar saf su ile tamamlanır. Her bir balonjojeden  5 mL  standart alınarak üzerine 5 mL 4-dimetil aminobenzaldehit eklenerek karıştırılır. 20 ºC’deki su banyosunda  5 dakika bekletilerek köre karşı absorbansları okunarak standart eğrisi oluşturulur.

Cihazı sıfır ayarı  kör denme için hazırlanan çözelti ile yapılır.
 
Deney sırasında dikkat edilmesi gereken noktalar
 
Deney sırasında örnek ve standartlar 20 ºC’ de hazırlanmıştır. Deneyin yapıldığı ortamın sıcaklığı da çok önemlidir. Ortam sıcaklığı 20 ºC olmalıdır. 1-2 ºC değişim bile %2 civarında hata getirmektedir.
Örnekteki üre miktarı % 3’ den fazla ise örnek seyreltilmeli.

Numune, amino asitler gibi basit azot bileşikleri içeriyorsa, optik yoğunluk 435 nm’de ölçülmelidir.  

Hesaplamalar
 
 Üre(%) : c x f x100
                  m x 1000

 
C = Hazırlanan standart eğrisine göre okunan yem örneğinin konsantrasyonu
V = Yem numunesinin hacmi mL
m = Başlangıçta alınan yem miktarı
f : Seyreltme faktörü