Kinin Tayini Analizi Nasıl Yapılır?

Kinin Tayini

Yöntemin Prensibi

Bu yöntem bazikleştirilen örneğin, kloroform ve sülfürik asit ile ekstraksiyonu sonucunda elde edilen çözeltinin 251 nm'de absorbans değerinin ölçümüne dayanmaktadır.

Kullanılan Malzemeler

• Spektrofotometre
• Spektrofotometre küveti
• Terazi
• Balonjoje (100 mL)
• Ayırma hunisi (100 mL)
• Pipet (2,5,10,25 mL)

Kullanılan Kimyasallar

1. 1N Sodyum hidroksit (NaOH) çözeltisi
2. Kloroform (analitik saf)
3. 1N Sülfürik asit (H2SO4) çözeltisi

Kinin stok çözeltisi: 150 mg kinin tarıldıktan sonra 20-30 mL 1N H2SO4 de çözülür. Çözelti 100 mL'lik balonjojeye aktarılır. Kininin tartıldığı kap bir kaç kez sülfürik asit ile yıkandıktan sonra çözelti 1N H2SO4 ile 100 ml'ye tamamlanır. Bu çözelti buzdolabında saklanmalıdır (1500 µg/mL)

Deneyin Yapılışı

Gazı alınmış örnekten, 100 ml'lik ayırma hunisine 10-20 ml alınır. Üzerine 3 ml 1 N NaOH ve 15 ml kloroform eklenerek 1 dakika süre ile çalkalanarak ekstrakte edilir. Kloroform fazı başka bir ayırma hunisine alınır. Örneğin üzerine iki kez daha kloroform eklenerek 1 dakika süre ile çalkalanıp, kloroform fazları başka bir 100 ml'lik ayırma hunisinde toplanır.

Toplanan kloroform fazları üzerine 20 ml 1 N H2SO4 eklenerekbirer dakika süre ile toplam üç kez ekstrakte edilir. H2SO4fazları 100 ml'lik bir ölçü balonuna alınır ve ayırma hunisi 1 N H2SO4 ile yıkandıktan sonra balon çizgisine 1N H2SO4 ile tamamlanır. Spektrofotmetre cihazının dalga boyu 251 nm'ye ayarlanarak cihazın 0 ayarı1N H2SO4 ile yapılır.

Standard Eğrinin Çizimi

100 mL'lik balonjojeye 10 mL stok çözeltiden, alınarak hacim çizgisine kadar 1 N H2SO4 ile seyreltilir (150µg/mL= 150mg/L). 150 ppm'lik standart çözeltisinden 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 ve 6,0 mL alınarak 100 mL'lik balonjojelere koyulur ve hacim çizgisine kadar 1 N H2SO4 ile tamamlanır (Balonjojelerde ki kinin konsantrasyonu sırası ile 1,5; 3,0; 4,5; 6,0; 7,5; 9,0 ppm (mg/L) dir) Hazırlanan standartların 251 nm'de absorbansları 1N H2SO4'e karşı okunarak konsantrasyon-absorbans standart eğrisi oluşturulur. Daha sonra bilinmeyen örneğin absorbansı okutularak oluşturulan standart eğrisi yardımı ile konsantrasyonu bulunur.

Hesaplamalar

Örnekteki kinin miktarı

Kinin (mg/L) = (CxV) / m

C: Örneğin standart eğrisinden okunan konsantrasyonu

V: Örneğin toplam seyreltildiği hacim mL

m: Alınan örnek miktarı