Tohum Aşılama Materyalinin Hazırlanması

Tohum Aşılama Materyalinin Hazırlanması

Önceleri nodülasyon oluşumunu sağlamak için ekilecek baklagil türünün etkin nodülasyon oluşturduğu tarla toprağı ekilecek tarlaya serpilip karıştırılırdır. Bu yönteme göre 1 dekar arazi için yaklaşık 400 kg. toprak taşınmalıdır. Bu oldukça fazla işgücüne ihtiyaç gösterir ve oldukça masraflıdır. Ayrıca yabani ot tohumlarının ve hastalık etmenlerinin taşınmasına da neden olduğu için sakıncalıdır. Günümüzde ise çok az masraflı olan ve çok iyi sonuç sağlayan baklagil tohumlarının uygun ve etkin bakteri ırkı ile aşılanması (inokulasyon) yöntemi kullanılmaktadır.

Toprak mikrobiyolojisi ile uğraşan araştırma enstitülerince veya ticari gayeyle bu işle uğraşan özel şirketlerce çeşitli baklagil türlerine uygun etkili bakteriler dolaşılarak tabiattan toplanır. Bunlar tarlada veya seralarda bitkilere aşılanarak etkinlikleri denenir ve etkin olanlar koleksiyonlar halinde saklanır. Bunlar her yıl toplanan yeni örneklerle denemelere alınarak etkinlikleri bakımından kontrol edilirler ve saflık kontrolleri yapılır. Koleksiyonlarda uzun süre canlı olarak muhafazaları için eni iyi yöntem “dry freezing” yöntemidir. Buna göre küçük steril bir pamuk parçasına emdirilen bakteriler küçük cam tüp içinde yüksek basınç ve çok düşük sıcaklığa (-50 ^oC / -60 ^oC) tabi tutulurlar böylece metabolizmaları minimuma indirilerek uzun yıllar saklanabilir.

Bu bakteriler gerektiğinde bu tüplerden çıkartılıp saflık kontrolleri yapıldıktan sonra sıvı besin ortamlarında (Yeast mannitol broth) 4-5 gün önce üremeye bırakılır. Daha sonra bakterilerin canlılıklarını koruyabilecekleri, hızla üreyebilecekleri, özellikle organik maddece zengin pH’sı nötr civarında olan çok ince öğütülmüş ve radyasyonla veya diğer yöntemlerle sterilize edilmiş pit (torf) adı verilen çürümüş bitki artıkları ile ½ oranında yani 40 gr. Pite 20 cc. Bakteri içeren sıvı besi ortamı şeklinde karıştırılarak pit kültürleri haline getirilir. Pit kültürleri 0.375 mm. Kalınlığındaki polietilen torbalara paketlenerek saklanır.

Bunlar sürekli gaz değişimi ve nemi istenen düzeyde tutmaları nedeniyle tercih edilirler. Rhizobiumların optimum sıcaklık isteklerinin 25⁰-27⁰C olmasına rağmen bu paketler nem kaybının önlenmesi için buzdolabında (4⁰C) saklanmalıdır. Yalnız bir tane Rhizobium ırkı içeren pit kültürleri hazırlanabileceği gibi birden fazla ırk içeren kültürlerde hazırlanabilir. Bunlar ırklarından birinin bazı çevre şartlarında etkinliğinin azalması bakımından önem taşır. Ayrıca birden fazla çapraz aşılama grubuna ait bakteri türlerini içeren kültürler de vardır. Bunlar ise dağıtımda kolaylık sağlar. Uygun ve etkin bakteriler bu şekilde satışa arz edilir.