Koruyucu Madde Tayini Analizi Nasıl Yapılır?

Koruyucu Madde Tayini

Prensip

Aktif ekmek mayası katkısı kullanılarak, fermentasyon tüpüne alınan meyve suyunun inkübasyon sonucunda oluşan karbondioksit hacmine göre kimyasal koruyucu madde eklenip eklenmediği tespit edilir.

Kullanılan Malzemeler

• Balonjoje (100 mL)
• Steril Erlen (250 mL)
• Fermentasyon Tüpü
• Terazi
• Pamuk
• Pipet (5,10 mL)
• İnkübatör

Kullanılan Kimyasallar

1. Potasyum dihidrojen fosfat (KH2PO4)
2. Magnezyum sülfat (MgSO4.7H2O)
3. Maya
4. Kieselguhr
5. L-asparajin monohidrat
6. Fermentasyon tüpü

Ölçüler mm'dir.

Ekmek mayası katkısının hazırlanması

1 g L-asparajin, 25 g glikoz, 0,5 g potasyum dihidrojen fosfat, 0,5 g magnezyum sülfat, çok az miktar saf su içerisinde çözülür. Çözelti 100 mL lik balonjojeye aktarılır. Üzerine su içinde ezilmiş olan 1 g ekmek mayası eklenir. Çözeltinin son hacmi saf su ile 100 mL ye tamamlanır. Balon içerindeki çözelti steril erlene aktarılır. Üzerine bir spatül ucu ile kieselguhr katılır. Kabın ağzı bir tıpa veya pamuk ile kapatılarak 20°C'da 24 saat inkübe edilir. İnkübasyonun bitiminde kap iyice karıştırılır ve pamuk katmanından süzülür. Süzüntüden 10 mL alınır ve üzerine 25 g glikoz, 1 g L-asparajin, 0,5 g potasyum dihidrojenfosfat, 0,5 g magnezyum sülfat, bir spatül ucu kieselguhr eklenerek iyice karıştırılır. Bu karışım tekrar steril bir erlene alınarak 25°C'da 48 saat inkübe edilir.

Deneyin Yapılışı

Meyve sularında yapılan analizlerde, analiz edilecek örnek haricinde birde hangi çeşit meyve suyunun analizi yapılacaksa tanık olarak aynı çeşidin saf meyve suyu da kullanılmalıdır. Fermentasyon tüplerinden birine 2 mL maya katkısı ve 10 mL saf meyve suyu (tanık), diğerine ise 2 mL maya katkısı ve 10 mL analiz edilecek meyve suyu koyulur. Fermentasyon tüpleri eğilerek sıvının, tüplerin göstergeli bölümüne dolması sağlanır ve açık uç pamuk ile kapatılır. 25°C'da 20 saat inkübasyondan sonra oluşan karbon dioksit hacmi göstergeden mL olarak okunur.

Analizler 3' er parelel yapılmalı

Sonuçların Değerlendirilmesi

20 saatlik inkübasyon sonucunda;

· Karbondioksit hacmi 5 mL den fazla ise fermentasyon pozitif (+)

· Karbondioksit hacmi 1-5 mL arasında ise fermentasyon pozitif (-)

Eğer;

· Fermentasyon pozitif (+): Koruyucu veya antibiyotik madde yoktur.

· Fermentasyon deneyi negatif (-): Koruyucu veya antibiyotik madde vardır.